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      緩沖液通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
　　為了保證緩沖液有足夠強(qiáng)的緩沖能力，在配制緩沖液時(shí)，需要做到：
　　1）為使共軛酸堿對(duì)的濃度比接近于1，應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對(duì)，使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH，例如，生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖液，已知H2PO4-的pKa2=7.21，因此，H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對(duì)。如若配制PH=9.0的緩沖液，則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(duì)（pKa（NH4+）=9.25）?？梢?jiàn)弱酸的Ka是選擇緩沖液的主要依據(jù)，表中列出了幾種常用的緩沖液。
　　選擇緩沖液的一般原則：
　　避免緩沖液與蛋白質(zhì)之間的不良反應(yīng)
　　使用低濃度避免費(fèi)特異性離子強(qiáng)度的干擾
　　緩沖液的pKa變化超過(guò)一個(gè)pH單位緩沖能力明顯下降
　　混合緩沖液在一定強(qiáng)度下往往有更寬的緩沖范圍
　　大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5，而在溫度下降到0℃時(shí)可達(dá)到8.0
　　要根據(jù)選用的分離方法選擇緩沖液：對(duì)于凝膠過(guò)濾，大多數(shù)緩沖液均適用，對(duì)于陰離子交換層析，陽(yáng)離子緩沖液Tris緩沖液，對(duì)于陽(yáng)離子交換和羥基磷灰石層析，陰離子緩沖液磷酸鹽緩沖液。